蛋白表達(dá)質(zhì)粒以PCR擴(kuò)增為基礎(chǔ)的各類(lèi)載體構(gòu)建，如大腸桿菌表達(dá)載體、酵母表達(dá)載體、桿狀病毒表達(dá)載體、哺乳動(dòng)物表達(dá)載體；報(bào)告基因載體等。蛋白表達(dá)質(zhì)粒按照復(fù)制性質(zhì)，可把質(zhì)粒分為兩類(lèi)：
1.嚴(yán)緊型質(zhì)粒
當(dāng)細(xì)菌染色體復(fù)制一次時(shí)，質(zhì)粒也復(fù)制一次，每個(gè)細(xì)菌內(nèi)只含1-2個(gè)質(zhì)粒；
2.松弛型質(zhì)粒
當(dāng)細(xì)菌染色體復(fù)制停止后仍然能繼續(xù)復(fù)制，每一個(gè)細(xì)菌內(nèi)一般含20個(gè)左右質(zhì)?？截悺＿@些質(zhì)粒的復(fù)制是在寄主的松弛控制之下的，每個(gè)細(xì)菌中含有10-200份拷貝，如果用一定的藥物處理抑制寄主蛋白質(zhì)的合成還可使質(zhì)?？截悢?shù)增至幾千份。
質(zhì)粒的擴(kuò)增會(huì)占用大量資源，當(dāng)載體用于表達(dá)或者其他用途時(shí)，也會(huì)使用上低拷貝質(zhì)粒。
質(zhì)粒的接合轉(zhuǎn)移是細(xì)菌遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移的一個(gè)重要方式。在質(zhì)粒轉(zhuǎn)移過(guò)程中，供體菌和受體菌通過(guò)結(jié)合作用緊密接觸，質(zhì)粒從供體細(xì)胞向受體轉(zhuǎn)移，同時(shí)進(jìn)行質(zhì)粒復(fù)制。按能否自主轉(zhuǎn)移，可以將天然存在的質(zhì)粒分為轉(zhuǎn)移型質(zhì)粒和非轉(zhuǎn)移型質(zhì)粒兩大類(lèi)。
這里要注意獲得質(zhì)粒的細(xì)菌可隨之而獲得一些生物學(xué)特性，如耐藥性或產(chǎn)生細(xì)菌素的能力等。從環(huán)境友好出發(fā)，實(shí)驗(yàn)室里的廢棄菌液，一定要滅過(guò)菌才能倒哦。
穿梭質(zhì)粒是指一類(lèi)人工構(gòu)建的具有兩種不同復(fù)制起點(diǎn)和篩選，因而可以在兩種不同類(lèi)群宿主中存活和復(fù)制的質(zhì)粒載體。此概念不僅用于不同的微生物菌群之間，也可推廣到真核生物表達(dá)載體的構(gòu)建，如用于枯草的pBE2、酵母的pPIC9K、哺乳動(dòng)物表達(dá)載體pMT2和用于植物細(xì)胞的Ti質(zhì)粒。這些穿梭質(zhì)粒不僅可以在大腸桿菌中復(fù)制擴(kuò)增，也可以在相應(yīng)的枯草、酵母、動(dòng)物或植物細(xì)胞中擴(kuò)增和表達(dá)。這樣利于對(duì)質(zhì)粒的分子生物學(xué)操作和大量制備。
更新時(shí)間：2021-06-25 
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