激酶重組蛋白在信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中的主要作用是什么？

　　激酶重組蛋白是一類催化蛋白質(zhì)磷酸化反應(yīng)的酶。它能把腺苷三磷酸上的γ-磷酸轉(zhuǎn)移并共價(jià)結(jié)合到特定蛋白質(zhì)分子中某些絲氨酸、蘇氨酸或酪氨酸殘基的羥基上，從而改變底物蛋白質(zhì)及激酶的構(gòu)象和活性。蛋白激酶內(nèi)都存在一個(gè)同源的由約270個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成的催化結(jié)構(gòu)區(qū)。在細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)、細(xì)胞周期調(diào)控等系統(tǒng)中，各種蛋白激酶形成了縱橫交錯(cuò)的網(wǎng)絡(luò)，在細(xì)胞的生命活動(dòng)中起了廣泛的作用。

　　激酶重組蛋白可聚集成組、家族和亞家族，伴隨序列相似性和生物化學(xué)功能的增加。激酶進(jìn)化樹圖顯示出這些催化區(qū)之間的序列相似性：兩個(gè)激酶間沿分支的距離與兩個(gè)序列間的差異成正比。已經(jīng)標(biāo)記七種主要組別，并用不同顏色進(jìn)行區(qū)分。在信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中主要作用有兩個(gè)方面：其一是通過(guò)磷酸化調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)的活性，磷酸化和去磷酸化是絕大多數(shù)信號(hào)通路組分可逆激活的共同機(jī)制，有些蛋白質(zhì)在磷酸化后具有活性，有些則在去磷酸化后具有活性；其二是通過(guò)蛋白質(zhì)的逐級(jí)磷酸化，使信號(hào)逐級(jí)放大，引起細(xì)胞反應(yīng)。

　　激酶重組蛋白的兩種檢測(cè)方法如下：

　　放射性同位素法：

　　使用放射性同位素方法有諸多優(yōu)點(diǎn)：它是直接檢測(cè)的方法，放射性同位素的靈敏度很高，測(cè)試結(jié)果非常準(zhǔn)確，被認(rèn)為是蛋白激酶生化活性檢測(cè)的“金標(biāo)準(zhǔn)”。因此，至今還有很多人繼續(xù)使用放射性同位素作為檢測(cè)激酶活性的方法。放射性同位素方法主要有膜過(guò)濾法和接近閃爍計(jì)數(shù)法兩類。

　　非均相非放射性同位素法：

　　由于放射性同位素存在上述一些缺點(diǎn)，科學(xué)家們開發(fā)了眾多的非放射性激酶檢測(cè)方法，包括酶聯(lián)免疫法、高效液相色譜法、質(zhì)譜法、核磁共振波譜法、毛細(xì)管電泳等。