穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建時轉(zhuǎn)染方法的選擇解答

　　穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建過程中轉(zhuǎn)染是一個很關(guān)鍵的過程，轉(zhuǎn)染就是在真核細胞里導入具有生物功能的核酸，并在細胞中維持其生物功能。轉(zhuǎn)染可謂是做生物學實驗的大家經(jīng)常會考慮的一項實驗技術(shù)，大致原理也都明白。實驗室實驗時若qpcr驗證的結(jié)果一直不行，可能就是轉(zhuǎn)染效率太低以至于無法進行后續(xù)的實驗。到底轉(zhuǎn)染是什么呢，為如何選擇轉(zhuǎn)染方法我們就來一探究竟吧！

　　穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建轉(zhuǎn)染方法的選擇：

　　我們熟知且常用的轉(zhuǎn)染方法主要有物理介導、化學介導、生物介導。但實驗室使用較多的主要有化學介導中的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染（質(zhì)粒轉(zhuǎn)染）和生物介導中的慢病毒轉(zhuǎn)染法。其中質(zhì)粒轉(zhuǎn)染操作簡單，一般瞬時轉(zhuǎn)染選擇較多，但有些細胞系不容易轉(zhuǎn)染，因此選擇轉(zhuǎn)染方式時一定要做足功課。千萬不要圖方便，否則轉(zhuǎn)染效率簡直崩潰。特別是養(yǎng)原代細胞的小伙伴，一點要認真選擇！

　　病毒轉(zhuǎn)染一般具有能夠穩(wěn)定表達的優(yōu)勢，且其對原代細胞有較高的轉(zhuǎn)染效率，其中更分為慢病毒轉(zhuǎn)染，逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)染和腺病毒轉(zhuǎn)染，其中腺病毒轉(zhuǎn)染可適合更為難轉(zhuǎn)染的細胞，例如懸浮細胞、T細胞、raw細胞等難轉(zhuǎn)染細胞。